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使用马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml配制培养基，马铃薯去皮后切块洗净，加水1000毫升，文火煮沸30分钟后过滤取汁，将琼脂放入液体内文火煮沸，持续搅拌至溶解，培养基煮好后趁热分装试管，塞上棉塞，包扎塑料薄膜，放入灭菌锅，之后拿出斜放，冷却后即凝固成斜面培养基。

（三）在无菌室内进行。用75％的酒精消毒工具，然后用右手拿耙在酒精灯火焰上，左手拿菌种瓶，并打开菌种瓶口，在火焰旁用耙取出一块小枣大小的菌种，迅速放人栽培料瓶中，经火焰烧口，用牛皮纸包扎好，放在培养室内培养。
（四）培养与管理在温度20～26℃，空气相对湿度在60%以下，约培养20～30天，菌丝即可长满全瓶；再继续培养，培养料上就会长出l公分大小的白色疙瘩或突起物，即为子实体原基？？芝蕾。

一、准备用品与试剂

主要包括各种营养物质、高压灭菌锅、天平、棉塞、试管（20毫米×200毫米）、稀碱液（1摩尔／升ＮａＯＨ溶液，即4克氢氧化钠溶于100毫升水）、稀酸液（1摩尔／升溶液，即84毫升浓加水916毫升）等。

灵芝母种制作技术

二、培养基配方

1、马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。

2、马铃薯100g、麸皮100克、蔗糖20g、KH2PO41g，MgSO40.5g、琼脂20g、水1000ml。

3、马铃薯200g、蔗糖20g、KH2PO42g，MgSO40.5g、维生素B120毫克、琼脂20g、水1000ml。

当芝蕾长到接近瓶塞时，拔掉瓶口棉塞，让其向瓶外生长，这时，控制室温在26～28℃，空气相对湿度在90％～95％，保持空气新鲜，给以散射光等条件，突起物芝蕾向上伸长成菌柄，菌柄上再长出菌盖，孢子可从菌盖中散发出来。从到长出菌盖，约需2个月时间。生常年要注意管理，每日要经过定时开窗的方法换气，如在气温偏高时，上、下午都要开窗。

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三、培养基配制

1、马铃薯等块茎、植物根去皮后切块洗净，加水1000毫升，文火煮沸30分钟后过滤取汁，其他各种成分称量要精准，配制流程中葡萄糖要zui后加入，灵芝通常要求PH5.5-6，用稀碱1摩尔/升Na〇H、稀酸1摩尔/升HC1来调整酸碱度至适度为止。将琼脂（若为条形需剪短）放入所配液体内，文火煮沸，煮时持续搅拌至溶解。

2、培养基煮好后趁热分装试管，装量为试管长度的四方之一左右，然后塞上棉塞。倾倒时要预防培养基沾污管口，万一沾上应用纱布擦净。试管要事先洗净，严防油渍。棉塞用未脱脂普通棉花，大小、松紧适中，要求与管壁紧贴。

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四、灭菌与培养

棉塞端包扎塑料薄膜，放入灭菌锅，经高压灭菌后，消除包扎的薄膜，直立于容器或框架内，使管内水蒸气向外界散发，当温度下降至50℃左右时（取试管1支贴放脸上，很烫但能放得住，大概在50℃左右），即可整捆斜放在斜面板上，斜面长度不能超过管长的二分之一，冷却后即凝固成斜面培养基。

通风口对于灵芝生长的效果是十分关键性的。在大棚两边的墙面上，每隔一米左右，要挖一个通风口，墙两边的通风口，要互相对应。大棚里的地面，和我们平经常使用的蔬菜大棚也有些不同,它是每隔40公分，挖一条灌水沟，灌水沟深25到30公分，宽度也是40公分左右。为了排灌水方便，能在大棚的一侧挖灌水沟，将横向的灌水沟一一串接起来。

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